Muzeja ekspozīcija veltīta latviešu teātra pirmsākumiem, Latvijas Nacionālā teātra vēsturei un Eduarda Smiļģa personībai un daiļradei.

Muzeja krājumā glabājas nozīmīgas scenogrāfijas, skatuves tērpu, rekvizītu, fotoattēlu, rokrakstu, dokumentu, dažādu piemiņas lietu kolekcija, tostarp plašs klāsts materiālu par eksistējošajiem, kā arī vēsturē aizgājušajiem Latvijas teātriem un ar teātra mākslu saistītajām personībām, aptverot laika posmu no teātru darbības pirmsākumiem Latvijā līdz pat mūsdienām.